면역 부전 바이러스를 위한 인간 반대 HIV 1&2 Elisa 시험 키트

3. 어세이 절차

• 모든 성분이 사용 전에 실온에 도달할 수 있게 허락하세요. 집중된 세척 버퍼 1시 20분을 ddH2O로 희석시키세요.
• 2 긍정적과 3 부정적인 제어에서 설정하세요. 긍정적의 디스펜스 100μl은 샘플 희석액 없이 각각 웰 안으로 정부 2통으로 부정적인 제어와 더불어 (HIV-1과 HIV-2)를 제어합니다. 어떠한 액체도 추가하지 않고 한 블랭크 웰을 백그라운드 조정기로 설정하세요. 샘플 희석액의 50μl을 각각 시험우물에 부가하고 테스트 웰스로의 50 μl 시험 시럼 또는 플라스마가 완전히 혼합된다고 덧붙이세요.
• 마이크로티터 플레이트를 습한 박스에 삽입하고 30 분 동안 37' Ｃ에 잠복하세요.
• 350μl이 잘 각각 세척 버퍼를 희석시킨 반응 용액과 에드를 포기하세요. 15-30seconds를 위해 젖은 후 세척 버퍼를 포기하세요. 모든 물을 내보내려고 적극적으로 플레이트를 뒤집고 잠시동안 흡수지에 우물의 림을 차단하여 5 배 그리고 나서 세척 절차를 반복하세요.
• 효소의 100μl이 잘 각각 결합한 에드. 1 분 동안 평평한 벤치 위의 마이크로티터 플레이트를 회전시킴으로써 점잖게 그것을 섞으세요. 효소 접합체를 블랭크 웰에 더하지 마세요..
• 마이크로티터 플레이트를 습한 박스에 삽입하고 30 분 동안 37' Ｃ에 잠복하세요.
• 각각 잘 5 배 약해진 1X 세척 버퍼로 잘 각각 이행하고, 그리고 나서 모든 물을 내보내려고 적극적으로 플레이트를 뒤집고 잠시동안 흡수지에 우물의 림을 차단함으로써의 세정.
• 기질 용액 A (HRP 기판)의 50μl을 각각 웰에 더하고 기질 용액 비의 50μl (TMB)를 각각 웰에 더하세요. 점잖게 혼합되고 37' Ｃ for15 분에 잠복하세요.
• 에드 1은 색 반응을 막기 위해 잘 각각 정지 용액의 (50μl)를 떨어뜨립니다.
• 이원적인 필터 플레이트 리더와 450 nm/630 nm에 OD 가치를 읽으세요. 단일 필터 플레이트 리더와 450 nm에 OD 가치를 읽는 것은 옵션입니다. (모든 웰로부터 모든 OD 읽기를 보정하기 위해 공백의 OD 가치를 잘 사용하기