EBV-VCA IgA AB 시험 elisa 장비 효소 면역 측정법 검사 플라즈마 표본

EBV-VCA IgA Ab elisa 장비 카탈로그 번호 : BE501A
엡스타인-바 바이러스 (EBV)의 바이러스성 입자 항원 (VCA)에 대한 IgA 항체의 탐지를 위한 효소 면역 분석 .
 
1. 분석의 원리
EBV-VCA IgA Ab elisa 장비는 마이크로플레이트 웰이 대단히 항원 부분 EBV-VCA에 해당한 재조합 항원으로 코팅되는 탐지 시스템을 활용합니다. 혈청 또는 플라즈마 표본이 제어되고 웰에 추가됩니다. 인큐베이션 동안, 견본에 존재한 EBV-VCA에 특이적인 IgA 항체는 마이크로플레이트 웰 상에 고정된 재조합 항원을 묶을 것입니다. 웰은 매여있지 않는 소재를 제거하기 위해 씻겨지고 항-인간 IgA 퍼옥시다제 콘쥬게이트가 항원 항체 복합물을 묶을 것이고 초과하는 매여있지 않는 효소 결합체가 씻음으로써 다시 제거됩니다. 효소 기질, 테트라메틸벤지딘 (TMB)는 기질이 결합된 효소에 의해 가수분해되고 청색 또는 청록 컬러가 EBV-VCA IgA 항체를 포함하여 웰에서 개발한다는 것 일 인큐베이션에 추가됩니다. 효소 반응은 황산의 추가에 의해 중지됩니다. 개발된 컬러의 강도는 (450 nm/630 nm) 450nm에 스펙트로포토메트릭앨리 읽히고, 견본에 존재하는 항체의 양에 비례합니다.
시약
 
2. 장비를 갖춘 재료 :

 
3. 어세이 절차

1. (대략 30 몇 분의 시간을) 사용하기 전에 elisa 장비 (모든 시약)과 견본을 실온에 가져오세요.
2. 집중된 세척 버퍼 1시 19분을 ddH2O로 희석시키세요. 예를 들면, 세정 완충 농축물의 5 밀리람베르트는 탈이온화되거나 증류된 물로 100 mL의 전체 양으로 희석되어야 합니다.
3. 각각 검사를 위해 한 블랭크 웰을 백그라운드 조정기, 2 긍정적과 3 부정적인 제어로 설정하세요. 포지티브 제어와 부정적인 제어가 개별적 웰 안으로 복제한 100 밀리람베르트를 분배하세요. 샘플과 HRP-콘주게이트 어느쪽도 블랭크 웰에 부가되어야 하지 않습니다.
4. 제어를 제외하고 개별적 테스트 웰스 안으로 샘플 희석의 100 밀리람베르트를 분배하세요.
5. 각각 테스트 샘플의 10 밀리람베르트를 테스트 웰스에 부가하세요 ; 혼합되기 위한 소용돌이.
6. 37' Ｃ에 30 분 동안 잠복하세요
7. 각각 잘 5 배 약해진 세척 버퍼로 잘 각각 이행하고, 그리고 나서 모든 물을 내보내려고 적극적으로 플레이트를 뒤집고 잠시동안 흡수지에 우물의 림을 차단함으로써의 세정.
8. 효소 접합체의 100 밀리람베르트를 추가합니다에게 각각 잘. 1 분 동안 평평한 벤치 위의 마이크로티터 플레이트를 회전시킴으로써 점잖게 그것을 섞으세요. 효소 접합체를 블랭크 웰에 더하지 마세요.
9. 37' Ｃ에 20 분 동안 잠복하세요
10. 5 배 7 단계로서 플레이트를 씻으세요.
11. 기질 용액 A (HRP-기판)의 한 하락 (50ml)를 각각 웰에 더하고 기질 용액 비 (TMB)의 한 하락 (50ml)를 각각 웰에 더하세요. 점잖게 혼합되고 30 분 동안 37' Ｃ에 잠복하세요. .
12. 에드 1은 색 반응을 막기 위해 잘 각각 정지 용액의 (50ml)를 떨어뜨립니다. 이원적인 필터 플레이트 리더와 450 nm/630 nm에 OD 가치를 읽으세요. 단일 필터 플레이트 리더와 450 nm에 OD 가치를 읽는 것은 옵션입니다. (모든 웰을 모든 OD 읽기를 보정하기 위해 공백의 OD 가치를 잘 사용하기)