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제품 상세 정보:
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| 목적: | 연구 용도 오직을 위해 | 저장: | 2-8C |
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| 상술: | 48 wells/96wells | 방법: | 샌드위치 |
| Cat. 아니오.: | In-Mo1153 | CV(%): | SD/meanX100 |
| 강조하다: | Ｅ 캐드헤린 elisa 장비,마우스 Ｅ Cad elisa 장비,조사 Ｅ 캐드헤린 elisa 장비 |
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이 elisa 장비는 샌드위치 엘라이저를 방법으로 이용합니다. 이 장비에 제공된 미세효소결합면역흡착검사 스트립판은 E-캐드에 고유한 항체로 사전 코팅했습니다. 표준 또는 표본은 적절한 미세효소결합면역흡착검사 스트립판 웰에 추가되고 특정 항원에 결합됩니다. 그리고 나서 서양고추냉이 과산화효소 (HRP) - E-캐드에 특이적인 콘쥬게이트 항체는 잘 각각 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에 추가됩니다 그리고 잠복했습니다. 부품 무료는 유실됩니다. TMB 기질 용액은 잘 각각에게 추가됩니다. 정지 용액의 추가 뒤에 있는 노랑이 오직 E-캐드 항체를 결합시킨 E-캐드와 HRP를 포함하는 그 웰만을 그런 다음 색에서 푸르게 나타나 돕니다. 사진 농도 (OD)는 450 nm의 사고 방식에서 스펙트로포토메트릭앨리 측정됩니다. OD 가치는 E-캐드의 집중에 비례합니다. 당신은 표준 곡선과 샘플의 OD를 비교함으로써 샘플에서 E-캐드의 집중을 계산할 수 있습니다.
재료는 장비로 공급했습니다
| 재료는 장비로 공급했습니다 | 48이지 확정 | 96이지 확정 | 저장 | |
| 1 | 사용자 교범 | 1 | 1 | R.T. |
| 2 | 폐쇄 판 얇은막 | 2 | 2 | R.T. |
| 3 | 실드백 | 1 | 1 | R.T. |
| 4 | 미세효소결합면역흡착검사 스트립판 | 1 | 1 | 2-8C |
| 5 | 표준 : 108pg/ml | 0.5ml×1 병 | 0.5ml×1 병 | 2-8C |
| 6 | 표준 희석액 | 1.5ml×1 병 | 1.5ml×1 병 | 2-8C |
| 7 | HRP-콘주게이트 시약 | 3ml×1 병 | 6ml×1 병 | 2-8C |
| 8 | 샘플 희석액 | 3ml×1 병 | 6ml×1 병 | 2-8C |
| 9 | 색원체 솔루션 A | 3ml×1 병 | 6ml×1 병 | 2-8C |
| 10 | 색원체 솔루션 비 | 3ml×1 병 | 6ml×1 병 | 2-8C |
| 11 | 정지 용액 | 3ml×1 병 | 6ml×1 병 | 2-8C |
| 12 | 워시 솔루션 | 20 밀리람베르트 (20X)×1bottle | 20 밀리람베르트 (30X)×1bottle | 2-8C |
절차
표준의 희석
1.10 웰은 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에서 표준에 대해서 설정됩니다. 웰 1과 웰 2에서, 100μl 표준 해결책과 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 3과 웰 4에서, 잘 1와 잘 2로부터의 100μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 50μl 솔루션은 웰 3과 웰 4로부터 포기됩니다. 웰 5와 웰 6에서, 잘 3와 잘 4로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 7과 웰 8에서, 잘 5와 잘 6로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 9와 웰 10에서, 잘 7와 잘 8로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 50μl 솔루션은 웰 9와 웰 10으로부터 포기됩니다. 희석 뒤에, 모든 웰에서 전체 양은 50μl이고 집중이 각각 24 ng/ml,16 ng/ml,8 ng/ml,4ng/ml과 2 NG (좋지않다) / 밀리람베르트입니다.
2. 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에서 공백 대조구로서 잘 비어 있는 것 떠나세요. 웰 샘플에서, 40μl 샘플 희석 버퍼와 10μl 샘플은 추가됩니다 (희석 비율이 5입니다). 샘플은 우물벽을 접촉하지 않고 바닥 위에 로딩되어야 합니다. 친절한 채 흔들린 것과 함께 다른 사람들과 친하게 지내세요.
3. 인큐베이션 : 폐쇄 판 얇은막으로 밀봉된 후 37C에 30 분을 배양하세요.
4. 희석 : 집중된 세척 버퍼를 증류수 (96T를 위한 30 번과 48T를 위한 20 번)로 희석시키세요.
5. 씻는 것 : 주의깊게 워시 솔루션으로 폐쇄 판 얇은막, 대기음과 리필을 벗기세요. 30 초 동안 쉰 후 워시 솔루션을 포기하세요. 5 번 동안 세척 절차를 반복하세요.
6. 각각 잘 비어 있는 대조군 웰을 제외하기 위해 50 μl HRP-콘주게이트 시약을 추가하세요.
7. 단계 3에서 묘사되는 것으로서의 인큐베이션.
8. 단계 5에서 묘사되는 것으로서 씻기.
9. 물드는 것 : 점잖게 흔들리는 것을 가진 각각 잘 혼합에 50 μl 색원체 솔루션 A와 50 μl 색원체 솔루션 비를 더하고 15 분 동안 37C에 잠복하세요. 착색 동안 빛을 회피하세요.
10. 종결 : 50 μl 정지 용액을 추가합니다에게 반응을 끝내 잘 각각. 웰에서 색은 파란색에서 노랑으로 변하여야 합니다.
11. 마이크로타이터 플레이트 리더를 이용하여 450nm에 흡광도 검안의를 읽으세요. 비어 있는 대조군 웰의 OD 가치는 제로로 설정됩니다. 분석은 정지 용액을 추가한 후 15 분 이내에 실행되어야 합니다.
정확성
측정 내 정밀도 (분석 이내에 정확성) : 낮고 중앙이고 높은 수준의 E-캐드와 3개 샘플은 각각 플레이트에 20 배 시험되었습니다.
분석 간 정확성 (분석 사이의 정확성) : 낮고 중앙이고 높은 수준의 E-캐드와 3개 샘플은 3 다른 플레이트에서 시험되었습니다, 8이 형판당에서 복제합니다.
CV(%) = SD/meanX100
인트라에세이 : CV<10>
분석 간 : CV<12>
분석 범위
0.6pg/ml -80pg/ml
민감도 :
0.1 피그 / 밀리람베르트
담당자: Mr. Steven
전화 번호: +8618600464506
