인터루킨-2 수용체 서브유니트 알파 마우스 IL2R CD25 IL2-RA elisa 장비

마우스 인터루킨-2 수신장치 서브유닛 알파 ; IL2R ; CD25 ;IL2-RA elisa 장비

재료는 장비로 공급했습니다

견본 요구조건

• 실온 10-20 감독이 필요한 미성년자, 원심분리에 있는 혈청 응고 다시 원심력인 형성된 강수 면, 2000-3000 r.p.m의 속도에 있는 20 분이 표면에 뜨는 물질을 제거합니다.
• 다시 원심력인 형성된 강우량 면, 항응고제로서 EDTA 또는 사이트레이트 플라스마를 어울린 플라스마 사용이 2000-3000 r.p.m 이전 표면에 뜨는 물질의 속도에 10-20 감독이 필요한 미성년자, 원심분리에게 20 분을 섞어서 만들어 줍니다.
• 소변 수집 수잔 무균용기, 원심분리 20 다시 원심력인 형성된 강우량 면, 2000-3000 r.p.m의 속도에 있는 분이 표면에 뜨는 물질을 제거합니다. 수흉의 작동과 그것을 뇌척수액 참조.
• 세포 배양 상층액은 분비 성분을 발견하고 손해배상을 수집하고 무균용기, 원심분리 20 2000-3000 r.p.m 이전 표면에 뜨는 물질의 속도에 있는 분, 세포의 구성을 발견하고, 희석되 PBS(PH7.2-7.4), 세포 농도와 세포 현탁액이 1 million / 밀리람베르트, 되풀이된 냉동-해동 주기, 손상 세포와 세포 내 성분, 원심분리 이 배포에 도달했습니다 2000-3000 r.p.m 이전 표면에 뜨는 물질의 속도에 있는 20 분, 강우량이 나타났으면, 다시 원심력입니다.
• 절단 샘플 뒤에 있는 조직 샘플이 중량을 확인하고 신속히 액화질소에 의해서 동결된 PBS(PH7.2-7.4)가, 손 또는 그라인더에 의해 균질이 되는 PBS(PH7.4)가 덧붙이는데, 원심분리를 녹인 후 샘플을 2-8C로 유지한다고 덧붙입니다 2000-3000 r.p.m 이전 표면에 뜨는 물질의 속도에 있는 20 분.
• 그리고 해당 문학에 따르면, 검체 수집 뒤에 최대한 빨리 뽑아내고, 추출 뒤에 최대한 빨리 실험이어야 합니다. 면 그것 수 있는 전혀, 견본이 보존하고 되풀이된 냉동-해동 주기를 회피하기 위해 -20 Ｃ에 남아 있을 수 있습니다.
• NaN3이 활동적인 HRP를 억제하기 때문에, NaN3을 포함하는 샘플을 발견할 수 없습니다.

원리

이 elisa 장비는 샌드위치 엘라이저를 방법으로 이용합니다. 이 장비에 제공된 미세효소결합면역흡착검사 스트립판은 IL2R에 고유한 항체로 사전 코팅했습니다 . 표준 또는 표본은 적절한 미세효소결합면역흡착검사 스트립판 웰에 추가되고 특정 항원에 결합됩니다. 그리고 나서 서양고추냉이 과산화효소 (HRP) - IL2R에 특이적인 콘쥬게이트 항체는 잘 각각 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에 추가됩니다 그리고 잠복했습니다. 부품 무료는 유실됩니다. TMB 기질 용액은 잘 각각에게 추가됩니다. 오직 IL2R와 HRP 컨쥬게이트 트롬보모듈린 항체를 포함하는 그 웰만을 색에서 파란색처럼 보이고 그리고 나서 정지 용액의 추가 뒤에 노랑을 돌릴 것입니다. 사진 농도 (OD)는 450 nm의 사고 방식에서 스펙트로포토메트릭앨리 측정됩니다. OD 가치는 IL2R의 집중에 비례합니다 . 당신은 표준 곡선과 샘플의 OD를 비교함으로써 샘플에서 IL2R의 집중을 계산할 수 있습니다.

기록 :

• 영수증에 4' Ｃ에 장비를 저장하세요.장비는 분석 전에 실온에 균형을 유지하게되어야 합니다. 어떠한 불필요한 스트립도 IL2R 항체 코팅되 플레이트에서 제거하고, 지퍼록 짚-잠금 포일에서 그들을 재실링하고 4' Ｃ를 잘하세요.
• 침전물은 집중된 세척 버퍼에 나타날 수 있습니다. 결과에 영향을 미치지 않을 모든 침전물을 해산하기 위한 버퍼를 가열되세요.
• 정확한 피펫은 실험 오차를 회피하는데 사용되어야 합니다. 샘플은 5 분 이내에 마이크로플레이트에 추가되어야 합니다. 만약 큰 표본의 수가 포함되면, 다중 채널 피펫이 권고됩니다.
• 표준 곡선은 모든 분석에 포함되어야 합니다. 레플리케이트 웰은 권고됩니다. 샘플의 OD 가치가 미안하지만, 기준의 제 1 웰보다 더 크면 검사 전에 샘플 (엔 시간)를 희석하세요. 미안하지만, 원래 트롬보모듈린 집중을 산정할 때 전체 희석 비율 (XnX5)를 증가시키세요.
• 상호 오염을 회피하기 위해, 마이크로플레이트 밀봉기는 단지 한번의 사용을 위한 것입니다.
• 빛으로부터 기판을 떨어뜨리세요.
• 모든 작동은 엄밀하게 제조사의 교육과 인가여야 합니다. 결과는 마이크로타이터 플레이트 리더에 의해 결정했습니다.
• 버퍼와 소모를 씻은 모든 샘플은 감염성 작용제들로서 치료되어야 합니다.
• 다른 다량으로부터의 시약은 섞이지 말아야 합니다.