뮤린 인터페론 감마 루오 시험 키트 쥐의 인터페론 감마 샌드위치법

쥐의 인터페론 γ ;인터페론 감마 ;IFN-γ ;ifn-감마 ;IFNG ;elisa 장비

시험관 내에서 양적인 것을 위해 쥐 혈청, 플라스마, 배지 또는 어떠한 생물학적 유체에서 인터페론 γ(IFN-γ) 집중의 확정.

원리

이 elisa 장비는 샌드위치 엘라이저를 방법으로 이용합니다. 이 장비에 제공된 미세효소결합면역흡착검사 스트립판은 IFN-γ에 고유한 항체로 사전 코팅했습니다. 표준 또는 표본은 적절한 미세효소결합면역흡착검사 스트립판 웰에 추가되고 특정 항원에 결합됩니다. 그리고 나서 서양고추냉이 과산화효소 (HRP) - IFN-γ에 특이적인 콘쥬게이트 항체는 잘 각각 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에 추가됩니다 그리고 잠복했습니다. 부품 무료는 유실됩니다. TMB 기질 용액은 잘 각각에게 추가됩니다. 정지 용액의 추가 뒤에 있는 노랑이 오직 IFN-γ 항체를 결합시킨 IFN-γ과 HRP를 포함하는 그 웰만을 그런 다음 색에서 푸르게 나타나 돕니다. 사진 농도 (OD)는 450 nm의 사고 방식에서 스펙트로포토메트릭앨리 측정됩니다. OD 가치는 IFN-γ의 집중에 비례합니다. 당신은 표준 곡선과 샘플의 OD를 비교함으로써 샘플에서 IFN-γ의 집중을 계산할 수 있습니다.

재료는 장비로 공급했습니다

• 표준의 희석

10 웰은 미세효소결합면역흡착검사 스트립판에서 표준에 대해서 설정됩니다. 웰 1과 웰 2에서, 100μl 표준 해결책과 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 3과 웰 4에서, 잘 1와 잘 2로부터의 100μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 50μl 솔루션은 웰 3과 웰 4로부터 포기됩니다. 웰 5와 웰 6에서, 잘 3와 잘 4로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 7과 웰 8에서, 잘 5와 잘 6로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 웰 9와 웰 10에서, 잘 7와 잘 8로부터의 50μl 솔루션은 각각 추가됩니다. 그리고 나서 50μl 표준 희석 버퍼는 추가되고 잘 섞입니다. 50μl 솔루션은 웰 9와 웰 10으로부터 포기됩니다. 희석 뒤에, 모든 웰에서 전체 양은 50μl이고 집중이 각각 180 피그 / 밀리람베르트, 120pg/ml, 60 피그 / 밀리람베르트, 30pg/ml과 15 피그 / 밀리람베르트입니다.

결과의 계산

마우스 IFN-γ 표준과 그것의 상응하는 읽기 OD의 알려진 집중은 각각 대수 스케일 (X-축)과 대수 스케일 (Y-축 상에) 플로팅됩니다. 샘플에서 마우스 IFN-γ의 집중은 Y-축에 샘플의 검안의를 구상함으로써 결정됩니다. 원래 농도는 희석 비율을 증가시킴으로써 산정됩니다.

정확성

측정 내 정밀도 (분석 이내에 정확성) : 낮고 중앙이고 높은 수준의 쥐 IFN-γ과 3개 샘플은 각각 플레이트에 20 배 시험되었습니다.

분석 간 정확성 (분석 사이의 정확성) : 낮고 중앙이고 높은 수준의 쥐 IFN-γ과 3개 샘플은 3 다른 플레이트에서 시험되었습니다, 8이 형판당에서 복제합니다.

CV(%) = SD/meanX100

인트라에세이 : CV<10>

분석 간 : CV<12>

분석 범위

3pg/ml-200 피그 / 밀리람베르트

민감도 :

0.8pg/ml