B형 간염 바이러스 핵심 항원 (HBcAb) 에 대한 항체

ELISA T에스트K그

비트로 진단 및 전문용으로만 사용합니다.

제품 이름

항HBc ELISA 테스트 키트 (세럽/플라즈마)

목적 사용

이 항HBc ELISA 테스트 키트는 인간 혈청/ 플라스마에서 B형 간염 바이러스 핵심 항원 (HBcAb) 에 대한 항체의 질적 검출입니다.반응제는 인간 혈청/플라즈마에서 B형 간염 바이러스 감염의 임상 검진 및 진단에 적합합니다..

시험 원칙

B형 간염 바이러스 (HBV) 는두 줄무늬 DNA 바이러스 Hepadnaviridae 가족에 속하며 C형 간염 바이러스 (HCV) 와 함께 혈액으로 전염되는 간염의 주요 원인으로 인식됩니다.HBV 감염은 가벼운, 보이지 않는 질병에서 완성 간염, 심각한 만성 간 질환,어떤 경우에는 간경화와 간암으로 이어질 수 있습니다.B형 간염 감염의 분류는 감염의 세 단계 (호발기, 급성 및 회복기) 동안 발현되는 여러 세로학적 마커를 식별해야합니다.

바이러스의 주요 구성 요소는 B형 간염 핵 항원 (HBcAg) 입니다.이 핵 항원은 핵 입자가 분해되면 방출되는 약 17kD의 단일 폴리 펩타이드로 구성됩니다.항원에 적어도 하나의 면역 결정자가 존재합니다.

HBsAg의 발병 직후 HBcAg에 대한 항체 (반 HBc 전체 항체 및 IgM) 가 나타나며 결코 사라지지 않습니다.면역학적으로 검출 가능한 항HBc 없이 B형 간염 감염이 발생할 수 있습니다.이것은 일반적으로 면역 억제 환자에서 발견됩니다. 항 HBc 검사는 다양한 인구에서 B 간염의 유병률에 대한 데이터를 제공합니다. 이것은 항 HBc가 급성,만성, 또는 HBV 감염이 해결되었습니다. 항 HBc의 식별은 임상 환경에서 진단 할 때 매우 중요합니다. 다른 B 간염 검사와 함께,항 HBc 마커는 올바른 진단과 바이러스의 진행을 적절히 모니터링 할 수 있습니다.항HBc는 B형 간염 감염의 유일한 지표가 될 수 있습니다. (HBsAg 음성 환자에 대한 다른 테스트를 포함하여).

HBcAb ELISA 테스트 시스템은 고체 단계, 1단계 잠복 경쟁 원칙에 기초합니다.그것은 마이크로플릿에 미리 코팅 된 정제 된 HBcAg의 일정한 양을 위해 호박 과산화 (HRP-Conjugate) 에 결합 된 단일 클론 항 HBc와 경쟁합니다.. 항 HBc가 존재하지 않으면 HRP 결합 된 항 HBc는 웅덩이 안의 항원들과 결합됩니다. 씻는 과정에서 결합되지 않은 모든 HRP 결합이 제거됩니다.크로모겐 용액 A와 B가 우물과 잠복 중에 추가 된 후, 푸른 색의 제품이 나타납니다. 황산과 반응이 중단되면 파란색 색이 노란색으로 변합니다. 표본에 HBcAg에 대한 항체의 존재는 낮은 색으로 나타납니다.또는 색이 전혀 없거나.

샘플 요구 사항

1.표본 수집:특별한 환자 준비가 필요하지 않습니다. 일반적인 실험실 관행에 따라 샘플을 수집합니다. 이 검사와 함께 신선한 혈청/ 플라스마 샘플을 사용할 수 있습니다.혈관 점착으로 수집 된 혈액은 적혈구의 혈전화를 피하기 위해 혈청을 혈전에서 가능한 한 빨리 분리해야합니다.혈청/ 플라스마 표본이 선명하고 미생물에 오염되지 않도록 주의해야 합니다.

2.H가벼운 간염증, 유방염증 또는 혈전증 샘플은 사용왜냐하면 그들은 검사에서 잘못된 결과를 줄 수 있기 때문입니다.열을 사용하지 마십시오 표본이것은 표적 분석물의 악화로 이어질 수 있습니다. 눈에 보이는 미생물 오염을 가진 샘플은 절대 사용해서는 안됩니다.

3. HBcAb ELISA는 개별 혈청/ 플라스마 샘플을 검사하기 위해만 사용됩니다. 시체 샘플, 침, 소변 또는 다른 체액 또는 집합 ( 혼합) 혈액을 검사하기 위해 테스트를 사용하지 마십시오.

4운송 및 보관: 표본을 2-8°C에서 보관한다. 3일 이내에 분석이 필요하지 않은 표본은 냉동 상태 (-20°C 이하) 에서 보관해야 한다. 여러 번의 냉동-열화 주기를 피해야 한다.운송용, 샘플은 임상 샘플과 윤리 요인의 운송에 대한 현행 지역 및 국제 규정에 따라 포장되고 표시되어야합니다.

시험 절차

1모든 반응제는 사용 전에 15 분 동안 실내 온도에 도달하도록 허용해야합니다.

2사용 전에 1:40 분해율로 세척 버퍼를 증류 물로 희석합니다.

3표본은 마이크로플릿의 수와 일치해야 하며, 각 플릿에는 음계 제어기 3개, 양계 제어기 2개, 빈 제어기 1개가 제공되어야 합니다.(이중 파장 감지로 감지하면, 빈 제어 우물을 설정하는 것은 허용되지 않습니다.)

참고: 교차 오염을 피하기 위해 각 표본, 부정적 검사 및 긍정적 검사에 대해 분리된 처분 pipette 끝을 사용하십시오.

4해당 우물에 50μL 샘플을 첨가합니다. (이 키트를 임상 보조 진단에 사용할 때, 테스트 할 샘플은 테스트를 위해 1:30에서 정상적인 소금액으로 희석해야합니다.전염병 조사에 사용 할 때, 원본 표본이 검출 될 수 있습니다 ), 50μL의 부정적인 제어 및 긍정적 통제를 부정적인 제어 우물 및 긍정적 제어 우물에 추가합니다.각각 효소 결합 50μL을 첨가합니다 (공백 우물에는 첨가하지 마십시오).

5오시일레이터로 30초 동안 흔들어라 (이 단계가 매우 중요합니다). 봉인판 막이 판을 봉인하는 상태에서 37°C에서 30분 동안 잠자합니다.

6잠복 끝에 접시 덮개를 제거하고 버립니다. 꺼내서 20초 동안 각 우물에 세척 버퍼를 넣습니다. 5번 반복합니다. 마지막 세척 순환 후,접시를 닦는 종이나 깨끗한 수건에 돌립니다., 그리고 잔해를 제거하기 위해 누르십시오.

7. 서브스트라트 A (50μL) 와 서브스트라트 B (50μL) 를 첨가한다. 비어 있는 우물에는 첨가하지 않는다. 흔들면서 부드럽게 섞는다. 35°C에서 15분 동안 뚜렷한 판막으로 뚜렷한 판을 봉인한다.

8. 각 우물에 50μL Stop Solution을 첨가하십시오 (공백 우물에는 첨가하지 마십시오). 흔들면서 부드럽게 섞어 반응 중단 후 10 분 이내에 흡수량을 읽으십시오.빈 잘로 판 리더를 캘리브레이트 하 고 450nm에서 흡수율을 읽으십시오이중 필터 기기를 사용하는 경우 기준 파장을 630nm로 설정합니다. 이중 파장을 사용하여 검출하는 경우 빈 우물을 설정할 수 없습니다. 절단 값을 계산하고 결과를 평가하십시오.