항-HCV 엘리사 검사 키트

사용 목적 

항-HCV 분석법은 사람 혈청 및 혈장에서 HCV 바이러스의 정성적 결정을 위한 효소 결합 면역 흡착 분석법(ELISA)입니다.

요약

C형 간염 바이러스는 전 세계적으로 수혈 후 및 지역사회에서 획득한 비A, 비B 간염의 가장 흔한 원인입니다. HCV 감염은 종종 만성 간염 및 간경변으로 이어지며, 간세포암 발달과 관련이 있습니다.1 C형 간염 바이러스는 Flaviviridae 계열의 자체 속으로 분류된 외피가 있는 양성 단일 가닥 RNA 바이러스입니다. 게놈은 구조 및 비구조 도메인의 3000 아미노산 폴리펩타이드를 암호화하는 약 9.5kb로 구성됩니다.2 다른 RNA 바이러스와 마찬가지로 HCV 게놈은 바이러스 복제 중에 발생하는 돌연변이로 인해 상당한 이질성을 나타냅니다. 전 세계적으로 최소 11개의 유전적으로 구별되는 유전자형과 여러 아형 및 바이러스 변종이 기술되었습니다.3 특정 유전자형에 의한 감염은 질병의 심각성과 치료 반응에 영향을 미칠 수 있습니다.4 C형 간염은 주로 오염된 혈액 및 혈액 제품을 통해 전염되며, 인체 분비물을 통해 낮은 비율로 전염됩니다.5

검사 원리

간접법.
총 검사 시간: 100분
항-HCV ELISA는 2단계 배양 절차에서 HCV에 대한 항체를 검출하기 위해 고체상, 간접 ELISA 방법을 사용합니다. 폴리스티렌 마이크로웰 스트립은 HCV(NS3, NS4 및 NS5)의 코어 및 비구조 영역에 해당하는 재조합 고면역 반응성 항원으로 사전 코팅되어 모든 HCV 유전자형을 검출할 수 있습니다. 첫 번째 배양 단계 동안, 항-HCV 특이 항체가 존재하는 경우 고체상 사전 코팅된 HCV 항원에 결합됩니다. 비결합 혈청 단백질을 제거하기 위해 웰을 세척하고, 효소 호스래디시 페록시다아제(HRP-결합체)에 접합된 마우스 항인간 IgG 항체(항-IgG)를 첨가합니다. 두 번째 배양 단계 동안, 이 HRP-접합 항체는 이전에 형성된 항원-항체(IgG) 복합체에 결합되며, 비결합 HRP-결합체는 세척으로 제거됩니다. 테트라메틸벤지딘(TMB)과 과산화요소를 함유한 발색원 용액을 웰에 첨가하고, 항원-항체-항-IgG(HRP) 면역 복합체가 존재하는 경우, 무색 발색원은 결합된 HRP 결합체에 의해 청색 생성물로 가수분해됩니다. 황산으로 반응을 중지시킨 후 청색은 황색으로 변합니다. 색상 강도의 양은 측정할 수 있으며, 웰에 포획된 항체의 양과 각각 샘플의 항체의 양에 비례합니다. 항-HCV 음성 샘플이 포함된 웰은 무색으로 유지됩니다.
 
 
기술 매개변수:

검체 채취 및 준비

• 본 분석법에는 사람 혈청이 권장됩니다.
• 샘플을 18-25°C에서 8시간 이상 밀봉하여 보관하십시오. 2-8°C에서 7일, -20°C에서 1개월 동안 안정합니다. 한 번만 동결하십시오.
• 열 비활성화된 샘플을 사용하지 마십시오.
• 샘플의 침전물 및 부유 고형물은 검사 결과에 영향을 미칠 수 있으므로 원심분리로 제거해야 합니다. 원심분리 전에 혈청 샘플에서 완전한 응고가 이루어졌는지 확인하십시오.
• 심하게 용혈되거나, 지질이 많거나, 탁한 샘플은 피하십시오.

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