1원하는 미세 덩어리 수를 계산하고 나머지 미세 덩어리를 제거하고
다시 닫을 수 있는 플라스틱 봉지, 봉인 및 후기 사용용으로 2-8°C 보관
2캘리브레이터와 샘플을 추가합니다.
21 빈 우물: 반응물을 첨가하지 마십시오.
2. 2 캘리브레이터 우물: 지정된 제어 우물에 캘리브레이터 100 μL를 첨가합니다.
2.3 시험 웅덩이: 시험 웅덩이에 100 UL 샘플 희석물을 첨가하고, 해당 웅덩이에 10 UL 샘플을 첨가한다.
2.4 판을 20초 동안 부드럽게 흔들고, 그 다음 판을 밀폐기로 덮는다.
3부화: 판을 37°C에서 30분 동안 부화합니다.
4세탁 단계 (수동 또는 자동 세탁으로 수행 할 수 있습니다):
수동 세탁: 방광 혼합물 을 폐기물 용기에 넣어 조심스럽게 제거 한다.
350μL의 희석 된 세탁 버퍼를 넣고 20-30초 동안 부드럽게 흔들고 세탁 용액을 완전히 폐기합니다. 4번 반복합니다.
마지막 세척 단계를 완료 한 후 흡수용 종이에 접시를 누르면 잔류 액체를 제거합니다.
자동 세탁: 자동 접시 세척기는 효율적인 세탁을 보장하기 위해 정렬되어야 합니다. 각 우물을 350 μL로 채워야 합니다.
분해 된 세척 버퍼를 넣고 20~30초 동안 젖혀주세요. 모든 우물을 완전히 흡수하세요. 4번 반복하세요.
5합성물: 빈 웰을 제외한 각 우물에 100 μL의 합성물 첨가합니다.
6잠복: 우물을 덮고 37°C에서 30분 동안 잠복합니다.
7세척 단계: 4단계에서 설명한 바와 같이 접시를 5번 세척합니다.
8기판: 빈 기판을 포함하여 각 우물에 기판 A와 B의 50 μL를 50 μL 추가합니다.
20초 동안 미세 구멍을 뚫고 37°C에서 15분간 암흑에 잠자합니다.
9- 스톱 용액: 각 우물에 50μL 스톱 용액을 첨가합니다. 긍정적 인 표본을 포함하는 우물에서 노란색 색이 형성되어야합니다.
10결과 읽기: 30분 이내에 450/630-700 nm에서 읽습니다.
1참고: 마이크로 플레이트는 450 nm 에서도 읽을 수 있습니다. 그러나 450/630-700 nm 에서 읽는 것이 강력합니다.
더 나은 결과.
시간 측정: 마이크로 플레이트 리더로 450nm에서 샘플의 광 밀도 (OD) 를 읽는다.
부정적 컨트롤의 평균 OD 값은 ≤ 0.1, 긍정적 컨트롤의 평균 OD 값은 ≥ 0.8, 테스트가 유효합니다.
그렇지 않으면 테스트가 무효입니다.
음역 제어 OD 값은 < 0입니다.10, 실제 값으로 계산됩니다.
귀하의 메시지는 20-3,000 자 사이 여야합니다!
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