1. 필요한 마이크로웰 수를 계산합니다. 나머지 마이크로웰을 제거하고 건조제와 함께 재밀봉 가능한 플라스틱 백에 넣고 밀봉하여 2-8°C에서 보관하여 나중에 사용합니다.
2. 보정액 및 샘플 추가:
2. 1 공백 웰: 시약을 추가하지 마십시오.
2. 2 보정액 웰: 지정된 대조 웰에 보정액 100 µL를 추가합니다.
2.3 검사 웰: 검사 웰에 샘플 희석액 100 µL를 추가한 다음 해당 웰에 샘플 10 µL를 추가합니다.
2.4 플레이트를 20초 동안 부드럽게 흔든 다음 플레이트를 실러로 덮습니다.
3. 배양: 플레이트를 37°C에서 30분 동안 배양합니다.
4. 세척 단계(수동 또는 자동 세척으로 수행 가능):
수동 세척: 배양 혼합물을 폐기물 용기에 버려 조심스럽게 제거합니다. 각
웰에 희석된 세척 완충액 350 µL를 채우고 20-30초 동안 부드럽게 흔듭니다. 세척 용액을 완전히 버립니다. 4회 반복합니다.
더. 마지막 세척 단계를 완료한 후 흡수지 위에 플레이트를 두드려 잔여 액체를 제거합니다.
자동 세척: 효율적인 세척을 보장하기 위해 자동 플레이트 세척기를 보정해야 합니다. 각 웰에 350 µL를 채웁니다.
희석된 세척 완충액을 넣고 20-30초 동안 담급니다. 모든 웰을 완전히 흡입합니다. 4회 반복합니다.
5. 접합체: 공백 웰을 제외한 각 웰에 접합체 100 µL를 추가합니다.
6. 배양: 웰을 덮고 37°C에서 30분 동안 배양합니다.
7. 세척 단계: 4단계에 설명된 대로 플레이트를 5회 세척합니다.
8. 기질: 공백 웰을 포함한 각 웰에 기질 A 50 µL와 기질 B 50 µL를 추가합니다. 마이크로웰을 20초 동안 부드럽게 흔듭니다. 37°C에서 어둠 속에서 15분 동안 배양합니다.
9. 정지 용액: 각 웰에 정지 용액 50 µL를 추가합니다. 양성 검체가 포함된 웰에는 노란색이 나타나야 합니다.
10. 결과 판독: 30분 이내에 450/630-700 nm에서 판독합니다.
1. 참고: 마이크로플레이트는 450 nm에서도 판독할 수 있지만, 더 나은 결과를 위해 450/630-700 nm에서 판독하는 것이 강력히 권장됩니다.
결과 해석
시간 측정: 마이크로플레이트 판독기로 450nm에서 샘플의 광학 밀도(OD)를 판독합니다.
평균 음성 대조군 OD 값 ≤ 0.1이고 평균 양성 대조군 OD 값 ≥ 0.8이면 검사는 유효하며,
귀하의 메시지는 20-3,000 자 사이 여야합니다!
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